Ensayos ADME-Tox

Los ensayos ADME, utilizados para evaluar la absorción, distribución, metabolismo y excreción, son fundamentales para la evaluación de candidatos a fármacos así como para otros productos farmacéuticos. Los ensayos para el screening ADME de Promega detectan la actividad del citocromo P450, la p-glicoproteína y la monoamino oxidasa, así como el glutatión total, indicador de estrés oxidativo.

La mayoría de moléculas pequeñas de fármacos son metabolizadas por las enzimas del citocromo P450 (CYP450). El metabolismo mediado por el CYP450 influye en la tasa de eliminación de los fármacos, su toxicidad y sus interacciones con fármacos administrados de forma simultánea. Los investigadores que se dedican al desarrollo de fármacos necesitan determinar cómo se metabolizan las nuevas sustancias a través del CYP450 y hasta qué punto pueden alterar la actividad de éste. Los P450-Glo™ CYP450 Assays son un método homogéneo y luminiscente que permite medir la actividad del citocromo P450. Están diseñados para medir la actividad de los P450 procedentes de fuentes recombinantes y nativas, así como para analizar el efecto en las actividades del P450 de fármacos o nuevas sustancias químicas, en formato de placa multipocillo. Los P450-Glo™ Luminescent Assays presentan una alta sensibilidad, un bajo ruido de fondo y un amplio rango dinámico.

Las monoaminooxidasas (MAO) son flavoenzimas situadas en la membrana externa de las mitocondrias que catalizan la desaminación oxidativa de una serie de aminas biogénicas y xenobióticas. Estas enzimas pueden oxidar los neurotransmisores y producir H₂O₂ tóxico. La capacidad de medir la actividad de la MAO así como el efecto de compuestos de estudio sobre dicha actividad es fundamental para seleccionar inhibidores específicos de la MAO, descubrir posibles interacciones entre fármacos y evaluar la desintoxicación o bioactivación catalizada por la MAO de diversos compuestos. El MAO-Glo™ Assay es un ensayo bioluminiscente sencillo, homogéneo y robusto para detectar de forma rápida y sensible la actividad de la MAO.

El GSH/GSSG-Glo™ Assay detecta y cuantifica el glutatión total (GSH + GSSG), el GSSG y el ratio GSH-GSSG en células cultivadas. Los cambios en los niveles de GSH y GSSG son importantes a la hora de evaluar las respuestas toxicológicas además de ser un indicador de estrés oxidativo, que puede conducir a la apoptosis o a la muerte celular. El ensayo de detección de GSH y GSSG ofrece una forma sencilla, rápida y en formato de placas multipocillo de medir señales luminiscentes estables que corresponden a la concentración total de GSH o de GSSG de la muestra en la placa de cultivo.