Ensayos de inflamación

Los ensayos para medir marcadores de inflamación o de activación del inflamasoma incluyen la determinación de la actividad de la caspasa-1 y la liberación de citoquinas por parte de las células, junto con ensayos para detectar patrones moleculares asociados al daño (DAMPs).

Proporcionamos ensayos para medir de forma directa la activación del inflamasoma a través de la actividad de la caspasa-1 o la liberación de IL-1β procesada en muestras de cultivos celulares. Los ensayos para detectar DAMPs incluyen el RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay, el cual detecta el ATP extracelular, un marcador clave de la muerte celular inmunogénica. Los ensayos cuentan con protocolos sencillos de add-mix-measure que permiten una detección fácil.

Los ensayos de inflamación son ideales para ser multiplexados con otros ensayos de salud celular que midan diferentes marcadores así como para aplicaciones de screening automatizadas de alto rendimiento.

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Introducción a los ensayos de inflamación

Dado que cada vez se presta más atención al papel de la inflamación en una amplia gama de enfermedades humanas, la capacidad de medir la activación del inflamasoma es cada vez más valiosa. La función de la inflamación en la inmunidad innata es protegernos de las enfermedades infecciosas. Sin embargo, las patologías asociadas a una inflamación crónica, como las enfermedades neurodegenerativas, la obesidad, las patologías hepáticas y la aterosclerosis, entre otras, suponen un reto asistencial cada vez mayor.

Los inflamasomas son complejos proteicos inducidos por una serie de estímulos inflamatorios. Las células inmunitarias innatas responden a los patógenos y a otros patrones moleculares asociados al daño con la formación de varios inflamasomas, incluyendo el inflamasoma NLRP3 y la activación de la caspasa-1. La activación de la caspasa-1 implica el procesamiento y la liberación de las citoquinas IL-1β e IL-18, además del desarrollo de una forma inmunogénica de muerte celular programada denominada piroptosis.

Tres ensayos complementarios se pueden utilizar para monitorizar la activación o inhibición del inflamasoma durante el proceso de descubrimiento de fármacos dirigidos al inflamasoma NLRP3 o a otros inflamasomas. El Caspase-Glo® 1 Inflammasome Assay mide de forma directa la activación de la caspasa-1 tras la formación del inflamasoma. Los Lumit™ IL-1β Immunoassays detectan la IL-1β procesada liberada por las células tras la activación del inflamasoma. Por último, el NanoBRET™ Assay para NLRP3 cuantifica el target engagement en células vivas. Póngase en contacto con nosotros para obtener más información sobre el NanoBRET™ Target Engagement Assay para NLRP3. Estos ensayos permiten realizar un screening de alto rendimiento de los moduladores del inflamasoma.

Otras citoquinas proinflamatorias, como el TNF-α, la IL-2 y el IFN-γ, desempeñan un papel en la inmunidad innata y adaptativa, que incluye la activación de las células T. Mediante la Lumit™ Technology podrá detectar estos marcadores clave de forma rápida y sencilla, mediante ensayos sin lavado que se completan en 70 minutos utilizando un luminómetro estándar.

Los esfuerzos de la inmuno-oncología por activar el sistema inmunitario en la lucha contra el cáncer y otras enfermedades son muy prometedores. Una nueva estrategia consiste en identificar tratamientos que incluyen ciertos fármacos quimioterapéuticos de moléculas pequeñas, anticuerpos conjugados con fármacos y virus oncolíticos que inducen la muerte celular inmunogénica. Para identificar estos inductores, se pueden utilizar ensayos que detectan patrones moleculares asociados al daño, como el ATP extracelular. El RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay detecta la liberación de ATP extracelular de forma cinética en células vivas, lo que permite identificar y establecer el posicionamiento de las terapias que inducen la muerte celular inmunogénica.