Ensayos de actividad quinasa

Las quinasas son una de las familias de enzimas más importantes y ampliamente estudiadas en la investigación bioquímica y médica. Las quinasas catalizan la transferencia de fosfato del ATP a una amplia variedad de sustratos celulares. Muchos procesos celulares, como la señalización celular, la división y el crecimiento celular, el desarrollo, la diferenciación y la muerte celular, están dirigidos por quinasas. En condiciones fisiológicas normales, la regulación de las quinasas está estrechamente regulada. Sin embargo, en condiciones patológicas, la actividad de las quinasas puede estar desregulada, y la alteración de las redes de señalización intracelular gobernadas por estas enzimas conduce a muchas enfermedades, incluyendo el cáncer y la inflamación. En consecuencia, las quinasas se han convertido en una importante diana para el descubrimiento de fármacos.

Dada la importancia de los inhibidores de las quinasas como posibles terapias, los investigadores utilizan tecnologías que monitorizan los cambios en la actividad de las quinasas y su modulación por inhibidores de moléculas pequeñas. Los métodos isotópicos para medir la actividad de las quinasas se consideran desde hace tiempo el método de referencia. Sin embargo, debido a problemas de seguridad y de gestión de residuos, se han buscado métodos alternativos. El ensayo ideal de quinasa tiene los siguientes atributos:

• universal
• independiente del sustrato
• escalable
• detecta la actividad a bajas tasas de conversión de sustrato
• amplio rango dinámico
• escasos resultados falsos positivos

Con estos objetivos en mente, hemos desarrollado un ensayo de detección de ADP basado en luminiscencia, ADP-Glo™ Kinase Assay, que mide la actividad quinasa cuantificando la cantidad de ADP producida en la reacción quinasa. En combinación con nuestros Kinase Enzyme Systems, Promega ofrece una de las más amplias gamas de ensayos bioquímicos completos de actividad quinasa.