Extracción de ARN
La pureza y la integridad del ARN extraído son fundamentales para su uso eficaz en aplicaciones como la RT-PCR, la RT-qPCR y la NGS. Los productos de purificación de ARN de Promega extraen ARN total, ARNm o miARN de alta calidad a partir de muchos tipos de muestras como sangre, células, tejidos, tejidos FFPE y preparaciones de ARN total. La gama de productos incluye soluciones de purificación de ARN para todos los niveles de procesamiento de muestras, desde la purificación manual hasta los sistemas automatizados de alto rendimiento.
Los PureYield™, ReliaPrep™ y SV Systems ofrecen una selección de kits para la purificación manual de ARN total o miARN, en formato tubo o placa de 96 pocillos. Los PolyATtract® Systems aíslan el ARNm a partir de ARN total o de lisados crudos.
Los Maxwell® RSC y Maxwell® 48 Instruments y kits proporcionan una purificación automatizada de ARN de sobremesa, de 1 a 48 muestras, utilizando cómodos cartuchos para distintos tipos de muestras. Los productos SV 96 (basados en membranas de sílice) y MagneSil® (purificación de tipo magnética) permiten la purificación automatizada de ARN de alto rendimiento con manipuladores de líquidos.
We offer RNA extraction products for all your throughput needs.
Descubre protocolos de extracción de ácidos nucleicos según el tipo de muestra
El Manual Técnico suministrado con cada kit contiene protocolos recomendados para determinados tipos de muestra. Además, seguimos testando otros tipos de muestras para a posteriori publicar los resultados en forma de breves Notas de Aplicación. Consulta nuestra base de datos de Notas de Aplicación para el tipo de muestra que te interese, y encontrarás protocolos de métodos manuales, Maxwell® o basados en placas.
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Fundamentos de la extracción de ARN
La purificación de ARN requiere cuatro etapas: 1) Disrupción de las células o del tejido; 2) Inactivación de la actividad de la ribonucleasa (RNasa) endógena; 3) Desnaturalización de los complejos nucleoproteicos; y 4) Eliminación de ADN y proteínas contaminantes. El paso más importante es la rápida inactivación de las RNasas endógenas, que se liberan de los orgánulos con membrana cuando las células se desintegran.
Los métodos de purificación de ARN suelen utilizar membranas de sílice, resinas y elementos magnéticos para la unión del ácido nucleico, e incorporan el tratamiento con DNasa para eliminar el ADN genómico contaminante. Posteriormente, el ARN purificado se eluye del soporte sólido.
El ARN es especialmente susceptible a la degradación y además las RNasas son ubicuas. Muchos métodos de purificación de ARN disponibles en el mercado incluyen productos específicos para inactivar las RNasas presentes en los lisados celulares o tisulares. También, pueden incluir inhibidores de las RNasas para evitar la degradación del ARN durante todo el procedimiento.
