En el pGEM®-T Vector, los promotores de la ARN polimerasa T7 y SP6 se encuentran en una región de clonación múltiple dentro de la región que codifica al péptido α de la β-galactosidasa. La inactivación por inserción del péptido α permite identificar de forma directa los clones recombinantes mediante un cribado azul/blanco en placas indicadoras. El vector permite la preparación de ADN monocatenario gracias a su origen de replicación f1.
La región de clonación múltiple está rodeada de sitios de reconocimiento de la enzima de restricción BstZI, lo que permite liberar el inserto mediante la digestión de una sola enzima. Otra opción podría ser realizar una doble digestión para liberar el inserto del vector.
El pGEM®-T Vector System II contiene células competentes JM109 además de todos los componentes del Vectores pGEM®-T Vector System I.
Referencias
- Mezei, L.M. and Storts, D.R. (1994) In: PCR Technology: Current Innovations, Griffin, H.G. and Griffin, A.M., eds., CRC Press, Boca Ratón, FL, 21.
- Robles, J. and Doers, M. (1994) Promega Notes 45, 19-20.
- Clark, J.M. (1988) Nucl. Acids Res. 16, 9677-86.
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